一、不脱钙骨切片的应用

不脱钙骨切片能更好地保持细胞结构，使观察的骨组织结构及其成分不失真，为研究骨组织成分、骨形成及骨形态计量学提供保证；并且可区别矿化骨和类骨质，用于诊断和测量骨矿化过程的异常。

二、仪器

本实验的半薄切片机可以直接制作5μm的切片，不需要进行磨片，因此对组织浪费少。本实验室的LeicaDM6000B生物显微镜及LeicaQWin图像分析系统，可以进行骨形成与骨吸收指标的检测。

半薄切片机    

Leica DM6000B生物显微镜和分析系统

三、检测标本及相关事项

1、可检测的标本：本实验室可以检测的标本是大鼠/小鼠胫骨、股骨。

2、本实验室制作切片的优点与缺点：

优点：

1）抗原的活性损失小：本实验室采用低温包埋技术制作不脱钙骨切片，可以较好的保护抗原的活性，可采用免疫组化的方法进行抗原活性的检测；

2）薄：本实验室制备的切片较薄，厚度可达5μm，可以进行细微结构的观察；

3）制作切片的数量多：采用本实验切片机制作的切片为5μm，不需要进行磨片，因此对组织浪费少，每个大鼠胫骨可制作10张切片，小鼠胫骨可制作5张切片；

4）制片成功率高：本实验室制片成功率可达90%以上。

缺点：

1）小体积样品：受切片机的限制，只能进行小组织的切片的制作，如大鼠股骨、胫骨；

2）时间长：由于本实验室采用低温包埋技术制作不脱钙骨切片，所以制片时间较长，制片时间周期为3个月。

四、收费标准

1、切片制作：

1）大鼠标本：770元/样品（含2张切片，一张白片用于检测MAR、mAR，另一张进行甲苯胺蓝染色以检测TBV％、TRS％、TFS％、OSW、），30个样品起做。

2）小鼠标本：1100元/样品（含2张切片，一张白片用于检测MAR、mAR，另一张进行甲苯胺蓝染色以检测TBV％、TRS％、TFS％、OSW、），30个样品起做。

2、拍照：

明场：22元/样本（包括50倍，100倍，400倍各一张）

荧光：荧光染料需要在动物处死前标记好，其中标记一种荧光染料的拍摄图像一张20元/样元，标记二种荧光染料可拍摄图像各一张30元/样品，倍数自定一种，图像质量的好坏与荧光染料的标记有关。

3、图像分析：

本实验室可以进行以下指标的检测：骨小梁面积百分比（TBV％）、骨小梁吸收表面百分比（TRS％）、骨小梁形成表面百分比（TFS％）、类骨质平均宽度（OSW）、骨小梁矿化率（MAR）、骨皮质矿化率（mAR）。这些指标可以反映骨形成与骨吸收的情况。每个指标分析周期为10个工作日，全套指标（共6项）价格可优惠至260元/样本。

每项指标所反应的意义如下：

（1）骨小梁面积百分比（TBV％）：骨小梁面积占被测骨髓腔总面积的百分比，55元/样本；

（2）骨小梁吸收表面百分比（TRS％）：不规则、凹凸不平的骨小梁表面占骨小梁表面的百分比，55元/样本；

（3）骨小梁形成表面百分比（TFS％）：有成骨细胞被覆的类骨质表面占骨小梁表面的百分比，55元/样本；

（4）类骨质平均宽度（OSW）：皮质内表面有成骨细胞被覆的类骨质的平均宽度，50元/样本；

（5）骨小梁矿化率（MAR）：骨小梁表面荧光双标记带的平均距离除以两次标记相隔的天数，可反映骨小梁矿化速度，88元/样本；

（6）骨皮质矿化率（mAR）：皮质内表面荧光双标记带的平均距离除以两次标记相隔的天数，可反映皮质骨矿化速度，88元/样本。

五、典型图片

本室制备的不脱钙骨切片的代表性图片（甲苯胺蓝染色法及荧光标记）

大鼠皮质骨上的类骨质 

大鼠胫骨骨小梁 

皮质骨的荧光双标记带  

骨小梁的荧光双标记带