BrightER内质网活细胞探针|高特异低毒性,成像流式双适配背景简介: 内质网(ER)是细胞蛋白合成、脂质代谢、钙信号调控、应激反应的核心细胞器,活细胞动态成像、流式定量是细胞生物学、肿瘤、病毒、自噬研究刚需。
目前市面主流 ER 标记方案存在明显短板:
1.荧光蛋白标记(KDEL-GFP):需要质粒转染,难转染原代细胞、干细胞,过表达会干扰内质网生理功能;
2.传统脂溶性 ER 染料:非特异性结合细胞膜脂质,背景高、光漂白严重,长时间成像损伤细胞;多数染料固定后信号丢失,无法兼顾长时程动态追踪。
BrightER 是法国CNRS(国家科学研究中心) 科学家 偶然发现的高选择性内质网荧光探针,由法国科研工具转化企业 Idylle Labs 完成产业化落地,专为活细胞内质网无干扰成像、流式定量开发,彻底规避传统标记方法缺陷,成果已发表《Nature Communications》等高分期刊,经过数十种细胞系标准化验证。
产品优势:二、核心产品优势(六大核心亮点)1. 无需转染,广谱通用细胞渗透性极强,直接添加至完全培养基即可染色,难转染原代细胞、肿瘤细胞、星形胶质细胞均可使用;已验证人源、鼠源、猴源共 9 类细胞系,无细胞类型限制。
2. 无细胞毒性,不干扰内质网生理大量功能实验证实:标记后不影响蛋白转运、内质网钙信号、UPR 未折叠蛋白反应、自噬通路;信号稳定维持3 小时连续成像,无需洗去染料,细胞可正常增殖、后续多轮观测。
3. 内质网高度特异性,完整勾勒ER网络靶向内质网蛋白(非脂质结合),几乎无非特异性膜背景;可完整标记内质网管网、核膜连续结构,适合细胞器互作(ER -溶酶体、ER -线粒体)共定位分析。
4. 高亮度、高光稳定,适配共聚焦 / 超高分辨搭载四甲基罗丹明(TMR)荧光基团,激发557 nm、发射576 nm,完美匹配实验室通用 TRITC/DsRed 滤片;荧光亮度高、抗光漂白,低激光强度即可成像,降低光损伤。
5. 一管两用:活细胞成像 + 流式细胞术同时支持共聚焦活细胞动态拍摄、流式定量检测,一套探针满足形态观察+定量统计双重需求;可用于 ER 应激水平、内质网总量批量检测。
6. 操作极简,性价比高液体预制液(5 mM DMSO+PEG 溶液),推荐工作浓度 50 μM,100 μL 原液可配制 10 mL 成像培养基;孵育数分钟即可成像,无需复杂重悬、长时间孵育。
注意:仅适用于活细胞,醛类固定后荧光信号无法保留,不支持固定样本染色。产品应用:1. 活细胞荧光成像(共聚焦 / 超高分辨 Airyscan)1)内质网形态动态观测:内质网管结构重塑、核膜分裂(有丝分裂);
2)细胞器互作研究:ER - 溶酶体接触位点、ER - 线粒体钙信号交流;
3)基础细胞通路:蛋白折叠、分泌通路、胞内物质转运、钙稳态调控;
4)疾病模型:病毒感染宿主内质网重塑、肿瘤细胞内质网应激;
5)共定位多色标记:可搭配 LysoTracker(溶酶体绿)、GFP 标记蛋白做多通道成像。
2. 流式细胞术定量实验1.药物诱导内质网应激批量检测(如毒胡萝卜素Thapsigargin 造模);
2.细胞内质网总含量定量;
3.基因敲除/过表达后ER功能变化高通量筛选;
4.细胞群体荧光强度统计学分析。
Fig.1 BrightER 探针染色活 HeLa 细胞(60 倍物镜拍摄) 产品信息:
| 品牌 |
货号 |
产品名称 |
英文名称 |
规格 |
| Idylle |
RGA-RET |
内质网活细胞探针 |
BrightER - Endoplasmic reticulum probe |
100ul |
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