软骨损伤定量工具|Chondrex #6018 试剂盒用于关节炎模型天然Ⅱ型胶原检测
简介:
II 型胶原是关节软骨、玻璃体等无血管组织的标志性基质蛋白,完整三螺旋天然 II 型胶原(UCII)是研究骨关节炎(OA)、类风湿关节炎、胶原诱导性关节炎(CIA)软骨损伤、口服免疫耐受机制的核心检测靶点。
常规胶原检测手段无法区分保持完整三螺旋的天然 UCII与解旋变性胶原碎片,极易造成实验数据失真。本文基于 Chondrex 官方 UCII 分析专题页面,从实验重复性、抗原特异性、高浓度钩状效应三大核心维度,完整拆解 #6018 II 型胶原检测试剂盒全套官方验证数据,适用于动物模型、原代软骨细胞、组织基质相关基础科研。
完整三螺旋结构是 UCII 维持抗原特性与基质功能的关键;温度>42℃加热、过度蛋白酶处理会破坏螺旋结构,生成无特异性抗原表位的变性单链胶原。在关节炎动物模型、软骨细胞体外损伤实验中,仅定量天然完整 UCII才能真实反映软骨基质完整度、胶原自身免疫原性水平。Chondrex 深耕细胞外基质检测体系,#6018 试剂盒专为多物种天然 II 型胶原定量,同时可提供样品检测技术支持。
试剂盒三大官方验证实验:1.重复性验证:批内 / 批间 CV 均<10%,实验数据稳定1)批内重复性(同板 5 次平行检测)
CV 值区间 2.1%~4.4%,同一样品平行孔误差极低,适合大批量组织样本同步检测;
2)批间重复性(分3日独立实验)
CV 6.3%~9.6%,跨批次实验一致性良好,长期动物造模样本纵向对比无明显系统偏差;
3)基质加标回收率
不同浓度样本加标 UC 后回收率 85.7%~97.4%,组织裂解液、细胞上清基质干扰弱,定量准确度可靠。
结论:试剂盒精密度、准确度双达标,适配 CIA、OA 模型批量软骨样本定量。
2. 抗原特异性验证:仅识别天然三螺旋 UCII,几乎不结合变性胶原1. 分子机制原理温和胃蛋白酶消化仅切除胶原两端端肽,完整保留中间三螺旋(科研标准 UCII 提取方案);加热>42℃会使三螺旋解旋,变性单链胶原失去试剂盒识别表位,且易被蛋白酶完全降解。
2.梯度变性样本定量结果
| 样本天然 UCII 占比 |
试剂盒检出率 |
| 0%(完全变性胶原) |
4.6% |
| 25% UCII |
23.4% |
| 50% UCII |
51.5% |
| 75% UCII |
71.6% |
| 100% 纯天然 UCII |
100% |
完全变性胶原仅微弱非特异性信号,试剂盒可精准区分完整软骨基质与降解变性胶原,避免软骨损伤程度评估虚高。

3. 高浓度钩状效应(Hook Effect)风险与规避方案1.风险阈值:1 步法体系中,胶原浓度>3μg/mL 即出现钩效应;浓度超 30μg/mL 结果严重失真;
2.两种标准化规避方案1) 更换2步法实验流程:无钩状效应,仅浓度超过标准曲线上限 200ng/mL 时出现信号饱和,高稀释复测即可;
2) 未知样本设置多梯度稀释(1:10/100/1000/10000),确保读数落在 3.1–200 ng/mL 线性检测区间。
产品应用:1.自身免疫关节炎:小鼠 / 大鼠 CIA 模型、类风湿关节炎机制、胶原特异性免疫应答研究;
2.骨关节退变:骨关节炎软骨基质降解、软骨细胞损伤修复体外实验;
3.基质免疫学:UCII介导倡导关节免疫耐受、自身抗原识别机制;
4多物种基质检测:人、小鼠、大鼠、鸡、牛、猪、马等软骨组织/细胞培养液定量。
| 品牌 |
货号 |
产品名称 |
中文名称 |
| Chondrex |
6018 |
Type II Collagen Detection ELISA Kit |
II型胶原检测试剂盒 |
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