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ApexBio品牌介绍

雨蛙素(Ceruletide)诱导急性胰腺炎动物疾病模型

简介:

  急性胰腺炎(Acute pancreatitis, AP)是临床上常见的急腹症,病因复杂,病死率达5%~10%,重症AP死亡率高达20%~30%,目前发病机制尚未阐述,无特殊治疗方式。目前活体AP动物模型制作常用方法大致有胰管结扎法、十二指肠闭袢法、胰胆管穿刺注射法、胰腺被膜下注射法、胰胆管注射法结合静脉输注法、蛙皮素联用脂多糖腹腔内注射法等。

  雨蛙素(Caerulein)是一种功能和组成上类似于胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)的胃调节分子,刺激胰腺腺泡细胞过度分泌,使细胞内的胰蛋白酶原和溶酶体水解酶分离障碍,经组织蛋白酶 B依赖性的方式激活,胰酶的活性又能够进一步导致酶原激活,引起一系列蛋白酶活性导致的细胞损害。胰腺组织自我消化引起的炎症反应募集炎症细胞,释放炎症因子,进一步引起局部甚至全身性的严重炎症反应。

操作流程:

1. 选用6周龄雄性C57BL/6小鼠,饲养于SPF级环境,维持12小时光暗循环,温度 20℃、湿度40%-60%,自由进食饮水。

2. 造模实施
1)动物预处理
造模前8小时对小鼠进行禁食处理(不禁水),减少胃肠内容物对胰腺检测的干扰。
2)雨蛙素配制
使用生理盐水将雨蛙素稀释至工作浓度。
3)腹腔注射
按100ug/kg体重的剂量,每1小时为小鼠腹腔注射1次雨蛙素,连续注射8次(多次低剂量注射可模拟人类急性胰腺炎的渐进性发病过程,避免单次高剂量导致的急性致死)。
4)空白对照
对照组小鼠同期腹腔注射等量生理盐水,排除注射操作本身的应激影响。
5)造模后观察与样本收集
造模后密切观察小鼠的精神状态、活动量、进食饮水情况及粪便性状,评估整体应激反应。首次注射雨蛙素24小时后,处死小鼠并收集关键样本:
a.胰腺组织
迅速分离胰腺,称重后部分固定于10%中性福尔马林(用于病理切片),部分冻存于液氮(用于分子检测)。
b.血液样本
眼眶取血后离心分离血清,用于检测淀粉酶、脂肪酶及炎症因子。
c.其他样本
根据研究需求可收集结肠、粪便等样本,用于关联分析。

3.模型验证:
1)胰腺组织病理学损伤
a.通过HE染色观察胰腺形态学变化,模型组可见胰腺腺泡细胞结构紊乱、水肿、坏死,大量炎症细胞浸润。
b.模型组胰腺/体重比升高,提示胰腺肿胀损伤。
2)血清消化酶水平升高
模型组血清淀粉酶、脂肪酶活性显著高于空白对照组,且差异具有统计学意义(p<0.0001),证实胰腺腺泡细胞受损导致消化酶释放入血。
3) 血清促炎因子释放
模型组血清促炎因子IL-6、TNF-α浓度显著升高,表明雨蛙素成功诱导了胰腺炎症的全身性扩散。

产品信息:

品牌 货号 CAS 号 产品名称 规格
APExBio B8465 17650-98-5 Ceruletide (雨蛙素) 5mg/10mg

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