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中文名称: | ADP血小板受体特异性拮抗剂(P2Y12)流式检测试剂盒 | 品牌: | Biocytex |
英文名称: | PLT VASP/P2Y12 | 货号: | 7014 |
规格: | 10 tests | 说明书: | |
货期: | 现货 | 保存温度: | 2-8℃ |
运输温度: | 2-8℃ | 浓度: | |
形态: | 亚型: | ||
免疫原: | 修饰: | ||
宿主: | 适应种属: | ||
靶点: | 克隆性: | ||
别名: | 标记: | ||
稳定性: | 应用范围: |
产品名称 | 货号 | 规格 | 应用 |
PLT VASP/P2Y12 | 7014 | 10T | 利用双染流式细胞术,通过VASP的磷酸化作用,测定P2Y12受体活性。 |
1 简介:
血管扩张刺激磷蛋白(VASP)是一种重要的细胞内血小板蛋白,基础状态下处于非磷酸化状态。其磷酸化,是受cAMP (环磷酸腺苷) 级联调节。前列腺素E1(PGE1)会激活级联反应,然而这种级联调节通过P2Y12蛋白受体被ADP抑制。
在检测时,VASP的磷酸化与P2Y12受体抑制效应密切相关,而VASP的非磷酸化状态与P2Y12 受体激活相关。
噻氯匹定和氯吡格雷对血小板受体的抑制作用是不可逆的。这种效应通过PGE1的激活,同时ADP的加入,而使VASP保持磷酸化,而被证实。
本试剂盒利用双色流式细胞测定术,通过VASP的磷酸化状态的测定,从而检测P2Y12受体活性。
2 方法:
先将全血单独与PGE1孵育或与PGE1+ADP混合孵育。细胞渗透后,处于磷酸化状态的VASP通过间接免疫荧光反应特异性的被单克隆抗体标记。使用双色流式细胞分析测定单独PGE1激活的和PGE1联合ADP处理管的校准平均荧光强度(mean fluorescence intensities,MF1),经减去空白对照得到校正后的MFIc,即减去阴性对照之后的平均荧光强度。再计算血小板反应指数(Platelet reactivity index,PRI),即VASP磷酸化水平,评估标本中ADP抑制VASP磷酸化的程度。
3 试剂组成
名称 | 组分 |
Reagent 1 | 1x 60ml 瓶,稀释液。 |
Reagent 2a | 1 x 100ul瓶,PGE1。 |
Reagent 2b | 1 x 200ul瓶,PGE1 + ADP |
Reagent 3 | 1 x 300ul 瓶,固定剂 |
Reagent 4a | 1 x 200ul 瓶,抗VASP-P 小鼠单抗+渗透剂 |
Reagent 4b | 1 x 100ul 瓶,阴性同型对照(小鼠单抗)+渗透剂 |
Reagent 5 | 1 x 300ul 瓶,染液,FITC 标记抗小鼠IgG多抗+血小板复染试剂 (抗CD61-PE标记)+渗透剂 |
4 需要自备的试剂
1)旋涡混匀器
2)计时器
3)流式细胞仪
4)移液器、枪头
5)上样管
5 试剂制备及保存
未开封包装的试剂可在2-8℃条件下,至包装上注明的有效期内。
注:忌冷冻。
所有试剂为即用型试剂,开封后,无污染的条件下,2-8℃可保持稳定性2月。
注意:
1)Reagent 3中含有2%-5%的多聚甲醛,吸入或皮肤接触会引起过敏。请按要求安全操作。
2)所有试剂包含叠氮钠(0.09%)防腐剂,请按要求操作,当皮肤接触到相关试剂时,用大量水彻底冲洗。