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关节炎造模注意事项

发布者:biolead 发布时间:2019-12-08 分享到:

一、关于小鼠、大鼠品系的选择:

1、胶原诱导的关节炎(CIA)易感品系选择:

1)小鼠的常用易感品系:DBA/1、B10.RIII等,而市场上常用的Balb/c和C57BL/6

不敏感,不推荐用于CIA造模。

注:也有客户用:转基因C57BL/6小鼠做CIA,具体操作可咨询我公司。

2)大鼠的常用易感品系:WistarFurth、LEW (RT11)、SD等

对于大鼠、小鼠CIA造模我们推荐客户选择相应的易感品系造模。

2.佐剂诱导的关节炎(AIA)易感品系选择:(AIA只针对大鼠。)

大鼠的常用易感品系:Wister-Lewis、SD、Wister、BrownNorway(BN)。

二、冻干胶原(cat#20011/20021)的稀释:

胶原总量为10mg,配置0.05m/L的醋酸,根据实验需求,用0.05m/L的醋酸稀释到指定浓度,4℃过夜溶解。比如:您配置2mg/ml的胶原,可用:5ml0.05mol/L的醋酸溶解。

三、免疫程序:

胶原佐剂配成乳剂后一定要检测乳剂的质量,乳化后的胶原滴入水中不扩散才能进行免疫,如果滴入水中扩散说明乳化效果不好,影响造模效果。乳剂现配现用,乳剂保存时间不超过1小时。

1.免疫部位:

A.胶原诱导的关节炎(CIA)

尾根部皮内注射:针头沿斜向上与鼠尾方向平行插入,次注射充分擦拭,防止乳液露出

首次免疫:针尖距尾根部12.5px

加强免疫:针尖距尾根部37.5px

B.佐剂诱导的关节炎(AIA)

尾根部皮内注射:针头沿斜向上与鼠尾方向平行插入,次注射充分擦拭,防止乳液露出。

单次免疫:从尾根部50px处插入针头,直到针尖插入位置距尾根部12.5px

注:AIA模型也有客户采用足底免疫。常常只在注射的单爪发生肿胀。

2.推荐免疫程序:

A.小鼠CIA造模:

初次免疫(0天):100ul乳剂(胶原+完全佐剂)/只 (注:完全佐剂浓度推荐4mg/ml。)

加强免疫(7天):100ul乳剂(胶原+不完全佐剂)/只

初次免疫后4-4.5周后发病。6-8周发病率在80-100%

B.大鼠CIA 造模:

初次免疫(0day):200 ul乳剂(胶原+不完全佐剂)/只

加强免疫(7day):100ul乳剂(胶原+不完全佐剂)/只

初次免疫后2-3周后发病。3周发病率在80-100%

C.佐剂诱导的关节炎(AIA):

单次免疫(尾根部免疫):100ul完全佐剂(CFA:10mg/ml)/只。

免疫后12-14天发病,发病率80-100%

注:造模影响因素很多,关于CIA、AIA、CAIA 注意事项和详细操作流程,可随时联系我们索要相应操作文档。

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